Електрофореза: шта је то, чему служи и како се то ради

Садржај

• За шта је то
• Како се то ради
• Врсте електрофорезе
• 1. Електрофореза хемоглобина
• 2. Електрофореза протеина

Електрофореза је лабораторијска техника која се изводи са циљем раздвајања молекула према њиховој величини и електричном набоју, тако да се може поставити дијагноза болести, потврдити експресија протеина или идентификовати микроорганизми.

Електрофореза је једноставан и јефтин поступак који се користи у лабораторијској рутини и у истраживачким пројектима. У складу са сврхом електрофорезе, можда ће бити потребно спровести друге тестове и прегледе да би се дошло до дијагнозе, на пример.

За шта је то

Електрофореза се може изводити у различите сврхе, како у истраживачким пројектима, тако и у дијагнози, јер је то једноставна и јефтина техника.Тако се електрофореза може извршити да би се:

• Идентификујте вирусе, гљивице, бактерије и паразите, с тим што је ова примена чешћа у истраживачким пројектима;
• Тест очинства;
• Проверити експресију протеина;
• Идентификовати мутације, на пример, корисне у дијагнози леукемије;
• Анализирајте врсте хемоглобина у циркулацији, што је корисно у дијагнози анемије српастих ћелија;
• Процените количину протеина присутних у крви.

У складу са сврхом електрофорезе, можда ће бити потребно спровести друге комплементарне тестове да би лекар довршио дијагнозу.

Како се то ради

Да би се извршила електрофореза, потребан је гел, који може бити полиакриламид или агароза у зависности од намене, пуфер за електрофорезу и каца, маркер молекуларне тежине и флуоресцентна боја, поред опреме за УВ или ЛЕД осветљење, познате и као трансиллуминатор.

Након припреме гела, мора се поставити одређени предмет тако да се јамице направе у гелу, популарно званом чешаљ, и пусте да се гел стегне. Када је гел спреман, само нанесите супстанце на јажице. Због тога се у једну јажицу мора ставити маркер молекуларне тежине, позитивна контрола, која је супстанца за коју се зна шта је, негативна контрола, која гарантује валидност реакције, и узорци који се анализирају. Сви узорци морају бити помешани са флуоресцентном бојом, јер је на овај начин могуће визуализовати траке на трансиллуминатору.

Гел са узорцима мора се ставити у посуду за електрофорезу, која садржи одређени пуферски раствор, а затим се уређај укључује тако да постоји електрична струја и, сходно томе, разлика потенцијала, што је важно за сепарационе честице у складу са њиховим оптерећење и величина. Време електрофоретског рада варира у зависности од циља поступка и може трајати до 1 сат.

Након наведеног времена, могуће је видети резултат електрофоретског проласка кроз трансиллуминатор. Када се гел стави под УВ или ЛЕД светлост, могуће је визуализовати образац повезивања: што је већи молекул, његова миграција је мања, приближавајући се бунару, док је светлији молекул, већи је миграциони потенцијал.

Да би се реакција верификовала, морају се визуализовати опсези позитивне контроле и у негативној контроли се не сме ништа визуализовати, јер је у супротном показатељ да је дошло до контаминације и цео поступак се мора поновити.

Врсте електрофорезе

Електрофореза се може изводити у различите сврхе и према њеној намени може се користити неколико врста гела, а најчешћи су полиакриламид и агароза.

Електрофореза за идентификацију микроорганизама чешће се изводи у истраживачким лабораторијама, међутим, у дијагностичке сврхе електрофореза се може користити за идентификацију хематолошких болести и болести које еволуирају са повећањем количине протеина, као главне врсте електрофорезе:

1. Електрофореза хемоглобина

Електрофореза хемоглобина је лабораторијска техника која се изводи за идентификацију различитих врста хемоглобина који циркулишу у крви, што омогућава идентификовање присуства болести повезаних са синтезом хемоглобина. Тип хемоглобина се идентификује електрофорезом при одређеном пХ, идеално између 8,0 и 9,0, са узорком трака који се може упоредити са нормалним узорком, што омогућава идентификацију абнормалних хемоглобина.

За шта је направљен: Електрофореза хемоглобина се изводи како би се истражиле и дијагностиковале болести повезане са синтезом хемоглобина, као што су анемија српастих ћелија и болест хемоглобина Ц, поред тога што је корисна у разликовању таласемије. Научите како да протумачите електрофорезу хемоглобина.

2. Електрофореза протеина

Електрофореза протеина је преглед који лекар захтева да би проценио количину протеина који циркулишу у крви и, самим тим, утврдио болести. Овај преглед се врши из узорка крви који се центрифугира да би се добила плазма, део крви који се, између осталих супстанци, састоји од протеина.

Након електрофорезе, може се визуализовати образац трака и, после тога, графикон на коме је назначена количина сваке фракције протеина, што је основно за дијагнозу.

За шта је направљен: Електрофореза протеина омогућава лекару да истражи појаву мултиплог мијелома, дехидратације, цирозе, упале, обољења јетре, панкреатитиса, лупуса и хипертензије према обрасцу трака и графикону представљеном у извештају о прегледу.

Разумети како се то ради и како разумети резултат електрофорезе протеина.